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酵母 mut+和 muts 的区别

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  SacI线性化后,通过LICl方法将构建好的重组载体转到毕赤酵母,MD板、G418板筛选到菌落后,怎样鉴定毕赤酵母是Mut+还是Muts,若是 Mut+如何诱导,请大家指教,不胜感激。  回复:  用点MM、MD平板点方法。准备几块MM、MD,平板用maker笔划小格子,标号,两种平板点标号要一一对应。准备无菌牙签,点取G418板上长出点菌落,先轻轻点MM平板(小格内),再点到MD平板相同标号点小格内。如此点约100个转化子,30℃培养2-5天,观察比较MM、MD上相同标号点菌落,MD平板上生长快,MM平板上生长缓慢或不生长点为Muts,生长速度一样点为Mut+。原理是Mut+能够快速利用甲醇为碳源,而Muts则不能利用甲醇为碳源。所以Mut+能够在含甲醇(MM)平板也快速生长,而Muts只能在含葡萄糖(MD)平板快速生长。  

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